等吸收法:在λ1的左右各選一點為λ2和λ3,使aλ2= aλ3=6/7 aλ1.維生素a醇。
③雜質吸收:對維生素a的測定有影響的雜質主要有:
維生素a2和維生素a3;維生素a的氧化產物(環氧化物、維生素a醛和維生素a酸);維生素a在光照下產生的無生物活性的聚合物鯨醇;維生素a的異構體;合成時產生的中間體。
④測定方法:第一法(使用於維生素a醋酸酯)
取維生素a醋酸酯,精密稱定,加環己烷製成每1ml中含9~15單位的溶液。然後在300、316、328、340、360nm五個波長處分別測定吸收值,確定最大吸收波長(應為328nm)。計算各波長下的吸收度與328nm波長下的吸收度的比值。
計算:
a.求吸收係數,吸收係數=a/cl. b.求效價(u/g),u/g=吸收係數×1900 1900為維生素a醋酸酯在環己烷溶液中測定的換算因數。
3.求維生素a醋酸酯膠丸為標示量的百分含量。
標示量%=(a×d×1900×w)/(w×100×l×標示量)
1u=0.344μg維生素a醋酸酯1u=0.300μg維生素a醇4.a值的選擇法第二法(適用於維生素a醇)
說明:
⑴維生素a醋酸酯的吸收度校正公式是用直線方程法(即代數法)推導出來的;維生素a醇的吸收度校正公式是用相似三角形法(幾何法或成6/7定位法)推倒出來。
⑵在套用三點校正法時,除其中一點在最大吸收波長處測定外,其餘兩點均在最大吸收峰的兩側上升或下降陡部的波長處進行測定。
維生素e維生素e(消鏇-α-生育酚醋酸酯)有天然片和合成品之分,天然品為右鏇體(d-α);合成品為消鏇體(dl-α)。
結構:維生素e為苯丙二氫吡喃醇衍生物,苯環上又一個乙醯化的酚羥基,故又稱生育酚。他主要有α、β、γ、δ四種異構體,其中以α異構體的生理作用最強。
性質:
溶解性:微黃色或黃色透明的粘稠液體,易溶於乙醇、丙酮、乙醚、石油醚,不溶於水。
具有紫外吸收。
在無氧或其它氧化劑存在時,在酸性或鹼性溶液中,加熱可水解生成游離生育酚;在有氧或其它氧化劑存在時,則進一步氧化生成醌型化合物。在鹼性條件下加熱,這種氧化作用更易發生。
鑑別試驗:
⑴硝酸反應:取本品約30mg,加無水乙醇10ml溶解後,加硝酸2ml,搖勻,在75℃加熱約15min,溶液應顯橙紅色。
⑵水解後氧化反應:取本品約10mg,加醇制氫氧化鉀試液2ml,煮沸5min,放冷,加水4ml與乙醚10ml,振搖、靜置使分層,取乙醚液2ml,加2,2‘-聯吡啶的乙醇溶液(0.5→100)數滴和三氯化鐵的乙醇溶液(0.2→100)數滴,應顯血紅色。
⑶紫外光譜法。
⑷薄層色譜法。
特殊雜質:
游離維生素e.利用游離維生素e的還原性,用硫酸鈰滴定液(0.01mol/l)滴定,以二苯胺為指示劑,限量為2.15%.含量測定:
⑴氣相色譜法:載氣:氮氣;固定相:矽酮(ov-17),塗布於經酸洗並矽烷化處理的硅藻土或高分子小球上;檢測器:氫火焰離子化檢測器;理論板數:按維生素e峰計算應不低於500;維生素e與內標物質的分離度應大於2.內標:正三十二烷。
⑵高效液相色譜法:c18柱;流動相為甲醇:水(49:1);紫外檢測器;波長292nm.維生素b1結構:維生素b1(鹽酸硫胺)是由氨基嘧啶環和噻唑環通過央甲基連線而成的季銨化合物,噻唑環上季銨及嘧啶環上氨基,為兩個鹼性基團,可與酸成鹽。
性質:
溶解性:本品在水中易溶,水溶液顯酸性反應。在乙醇中微溶,在乙醚中不溶。
具有紫外吸收。
在鹼性中遇氧化劑,如鐵氰化鉀,可被氧化為具有螢光的硫色素,後者溶液正丁醇中呈藍色螢光。
分子中含有兩個雜環,故可與某些生物鹼沉澱試劑反應生成組成恆定的沉澱。
鑑別試驗⑴硫色素反應方法:取本品約5mg,加氫氧化鈉試液2.5ml溶解後,加鐵氰化鉀試液0.5ml與正丁醇5ml,強力振搖2min,放置使分層,上面的醇層顯強烈的藍色螢光。加酸使成酸性,螢光即消失。再加鹼使成鹼性,螢光又顯出。
原理:維生素b1在鹼性溶液中,可被鐵氰化鉀氧化生成硫色素。硫色素溶於正丁醇(或異丁醇等)中,顯藍色螢光。
⑵沉澱反應維生素b1與碘化汞生成淡黃色沉澱維生素b1與碘生成紅色沉澱維生素b1與矽鎢酸生成白色沉澱含量測定方法有:矽鎢酸重量法、硫色素螢光法、非水溶液滴定法和紫外分光光度法。
中國藥典收載紫外分光光度法維生素c結構:維生素c分子結構中具有二烯醇結構和內酯環,且有二個手性碳原子(c4、c5),因此不僅使維生素c性質極為活潑,且具鏇光性。
性質:
溶解性:維生素c在水中易溶,水溶液呈酸性,在乙醇中略溶,在氯仿或乙醚中不溶。
結構遇糖類相似,也具糖的性質。
分子中二烯醇基具極強的還原性,易被氧化為二酮基而成為去氫抗維生素c,加氫又可還原為維生素c.在鹼性溶液或強酸性溶液中能進一步水解為二酮古羅糖酸。
c3-oh由於受共軛效應的影響,酸性較強;c2-oh的酸性極弱,故維生素c一般表現為一元酸,能與碳酸氫鈉作用生成鈉鹽。
分子中有兩個手性碳原子,故有四個光學異構體,其中l(+)-維生素c活性最強。
維生素c和碳酸鈉作用可生成單鈉鹽,不致發生水解,因雙鍵使內酯環變得較穩定;但在強鹼中,內酯環可水解,生成酮酸鹽。
維生素c有共軛雙鍵,在稀礦酸溶液中,在245nm波長處有最大吸收;若在中性或鹼性條件下,則紅移至265nm處。