人豬流感(H1N1)病例標本採集和實驗室檢測指南

豬流行性感冒( h1n1病毒)病毒的檢測

所有豬流行性感冒( h1n1病毒)疑似病例應該採集上呼吸道標本來檢測豬流行性感冒( h1n1病毒)的病毒。

推薦採集的呼吸道標本:

疾病發病後應儘快採集如下標本:鼻咽拭子/吸取物或者鼻腔沖洗液/吸取物。如果不能收集這些標本,可合併鼻拭子與口咽拭子。氣管插管的病人也應收集氣管吸取物。標本應置於無菌病毒運輸液( vtm ) ,並立即用冰塊或冰排保存或置於4 ℃ (冰櫃),並馬上運送至實驗室。臨床樣品收集人員及實驗室人員的感染控制指導請見相關檔案。

拭子

理想的情況下,標本應使用頭部為合成纖維的拭子(例如,聚酯纖維 ),用鋁或塑膠做桿。不推薦棉拭子和木桿。不能用海藻酸鈣做的拭子收集標本。標本採集管應包含3毫升病毒運輸液(例如,含有蛋白質穩定劑,阻止細菌和真菌生長的抗生素,緩衝液) 。

臨床標本儲存

所有呼吸道標本應保存在4℃ ,並儘快放置在-70℃。如果沒有-70℃度冰櫃,標本應保存在4℃ ,但不應超過4天。 

臨床標本運輸

臨床標本應按照a類包裝要求運送,並用乾冰運輸。

所有標本應標示清楚。疑似病例標本運送應包含的信息請參照禽流感標本運輸。

檢測程式

呼吸道標本應首先套用real time rt-pcr方法檢測a型流感病毒的m基因、swine( h1n1)的ha基因和np基因,以及質控對照rnp基因。同時,接種mdck細胞或spf雞胚進行病毒分離,並測定病毒的全基因組序列。

推薦的檢測方法

用real-time rt-pcr方法檢測豬流行性感冒( h1n1病毒)病毒。

其他檢測方法 

快速流感抗原檢測

一些商用快速檢測可以區分a和b型流感病毒 。快速檢測實驗a型流感陽性的病例符合可能病例的標準(見上文) 。這些實驗對檢測人感染豬流行性感冒( h1n1病毒)病毒臨床標本的敏感性和特異性未知,而且檢測季節性流感病毒的靈敏度不佳。因此,快速檢測陰性結果可能是假陰性,不能作為豬流感感染的最後診斷。

免疫螢光法(或裝配的ifa )

免疫螢光試驗可以區分a和b型流感病毒 。檢測a型流感陽性的病例符合可能病例的標準(見上文)。免疫螢光試驗的結果取決於臨床標本的質量,操作技能,對檢測人感染豬流行性感冒( h1n1病毒)病毒臨床標本的敏感性和特異性未知。因此,免疫螢光試驗陰性結果可能是假陰性,不能作為豬流感感染的最後診斷。

病毒培養

可用mdck細胞和spf雞胚分離豬流感( h1n1病毒)病毒可以診斷感染,但無法為臨床診斷及時提供結果。病毒分離陰性並不能排除感染豬流感( h1n1病毒)病毒。