基本結構：均具有環戊烷駢多氫菲母核。
分類：
1.腎上腺皮質激素：皮質酮衍生物，如可的松、潑尼松、地塞米松等。
本類藥物多為c21-羥基所形成的酯類。
結構特點是具有21個c原子：a環：具有δ4-3-酮基；c17：具有α-醇酮基並多數有α-羥基；c10、c13：具有角甲基；c11：具有羥基或酮基；其它：有些皮質激素具有δ1,6α、9α鹵素，16α羥基，6α、12α、16α、16β甲基等。
2.雄性激素及蛋白同化激素：甲睪酮、丙酸睪酮、十一酸睪酮等；蛋白同化激素有苯丙酸諾龍。
結構特點：雄性激素具有19個c原子；蛋白同化激素具有18個c原子（c10上無角甲基）；a環：具有δ4-3-酮基；c17：無側鏈，多數是一個β-羥基，有些是由他形成的酯，有些具有α-甲基。來源：考試大
3.孕激素：也稱為黃體酮激素或孕酮。典型藥物為黃體酮。
中國藥典收載有：黃體酮、醋酸甲羥孕酮、己酸羥孕酮、醋酸甲地孕酮原料及製劑；醋酸氯地孕酮原料等。
結構特點：具有21個c原子；a環：具有δ4-3-酮基；c17：具有甲酮基，有些具有α-羥基，與醋酸、已酸等形成酯（如醋酸甲地孕酮、醋酸氯地孕酮、己酸羥孕酮等）；其它：有些具有δ6、6β-甲基、6α-甲基、6β-氯。
4.雌激素：又稱卵泡激素。雌二醇、炔雌醚、苯甲酸雌二醇、戊酸雌二醇、炔雌醇原料及製劑等。
結構特點：具有18個c原子；a環：為苯環，c3上具有酚羥基且有些形成了酯或醚；c10：無角甲基；c17：具有β-羥基或酮基，有些羥基形成了酯，還有些具有乙炔基。
口服避孕藥：炔諾酮、炔諾孕酮、炔孕酮。多數在a環上具有δ4-3-酮基，與黃體酮和睪酮一致；有的在c17上具有β-羥基、α-乙炔基或甲酮基；有的在c10上無角甲基，與雌激素相同。來源：考試大
鑑別試驗：
呈色反應
1.與強酸的呈色反應：許多甾體激素能與硫酸、磷酸、高氯酸、鹽酸等呈色，其中與與硫酸的呈色反應套用較廣。
藥品名稱顏色螢光加水稀釋後的變化
醋酸可的松黃或微帶橙無顏色消失溶液澄清
氫化可的松棕黃至紅綠色黃至橙黃微帶綠色螢光，少量絮狀沉澱
潑尼松橙無黃至藍綠
潑尼松龍深紅無紅色消失，灰色絮狀沉澱
炔雌醇深紅黃綠
地塞米松磷酸鈉黃或紅棕無
某些甾體激素藥物與硫酸-乙醇或硫酸-甲醇作用而呈色。如甲睪酮：取本品數毫克，加硫酸-乙醇（2：1）1ml使溶解，即顯黃色並帶有黃綠色螢光。
2.官能團的呈色反應：
①c17-α-醇酮基的呈色反應：皮質激素類藥物分子結構中c17位上的α-醇酮基具有還原性，能與氧化劑四氮唑鹽反應而呈色。如醋酸潑尼松在鹼性條件下與氯化三苯四氮唑試液反應生成紅色。
②酮基的呈色反應：甾體激素分子結構中含有酮基，如c3-酮基和c20-酮基,均能與2,4-二硝基苯肼、異煙肼、硫酸苯肼等羰基試劑呈色。例如，醋酸可的松、氫化可的松等，其甲醇或乙醇溶液加新制的硫酸苯肼試液，加熱即顯黃色。
③甲酮基的呈色反應：甾體激素分子結構中含有甲酮基乙基活潑亞甲基時，能與亞硝基鐵氰化鈉、間二硝基酚、芳香醛類反應呈色。其中亞硝基鐵氰化鈉反應可認為是黃體酮的靈敏、專屬的鑑別方法，在一定的條件下，黃體酮顯藍紫色，其他常用甾體激素均不顯藍紫色，而呈現淡橙色或不顯色。
④有機氟的呈色反應：一些含氟的甾體激素藥物（如醋酸氟輕鬆、醋酸地塞米松等），經氧瓶燃燒法後生成無機氟化物，在12%醋酸鈉的稀醋酸中與茜素氟藍及硝基亞鈰起反應，即顯藍紫色。來源：考試大
⑤酚羥基的呈色反應：c3為酚羥基的雌激素，能與重氮苯磺酸反應生成紅色偶氮染料。如jp(13)收載的苯甲酸雌二醇利用該法進行鑑別。
沉澱反應
1.與斐林試劑的沉澱反應
皮質激素的c17-α-醇酮基具強還原作用，與斐林試劑反應生成橙紅色氧化亞銅沉澱。
2.與氨制硝酸銀的沉澱反應
皮質激素的c17-α-醇酮基具強還原性，與氨制硝酸銀反應，生成黑色金屬銀沉澱。
3.與硝酸銀的沉澱反應
含炔基的甾體激素，如炔雌醇、炔諾酮，遇硝酸銀獎試液，即生成白色的炔雌醇銀鹽沉澱及白色炔諾酮銀沉澱。
4.與硝酸—硝酸銀的沉澱反應
甾體激素（如丙酸氯貝他索、丙酸貝氯米松）中有機結合的氯，經加熱或進行有機破壞生成無機氯化物，再在硝酸酸性條件下與硝酸銀作用，生成氯化銀的白色沉澱。
製備衍生物測定其熔點
利用甾醇、甾酮類藥物與一些試劑反應生成酯、肟、縮氨脲，或利用醇制鹼液水解甾體酯類生成相應的母體，然後測定其熔點進行鑑別。
1.酯的生成：如炔雌醇製成苯甲酸酯。
2.酮肟的生成：如黃體酮與鹽酸羥胺作用生成黃體酮雙酮肟為例。
3.縮氨基脲的生成：chp收載苯丙酸諾龍生成其縮氨基脲衍生物。
4.酯的水解：如丙酸睪酮用醇制氫氧化鉀水解為例。
水解產物的反應
戊酸雌二醇、已酸羥孕酮等藥物，先在鹼液中水解，經酸化加熱分別產生戊酸、己酸特臭，用此法可鑑別這兩種藥物。
紫外分光光度法
丙酸倍氯米松的乙醇溶液（20μg/ml）在239nm波長處有最大吸收。
紅外分光光度法
薄層色譜法
中國藥典收載的炔諾酮、炔雌醚片、丙酸睪酮注射液、倍他米松磷酸鈉、醋酸氯地孕酮片、醋酸甲羥孕酮片、醋酸潑尼松片、苯丙酸諾龍注射液、戊酸雌二醇注射液、苯甲酸雌二醇注射液、複方己酸孕酮注射液、複方炔諾酮片、複方炔諾酮膜、複方炔諾孕酮片、複方炔諾孕酮滴丸、哈西奈德軟膏等甾體激素藥物均採用了薄層色譜（標準品對照法）進行鑑別。
高效液相色譜法：
中國藥典中醋酸氟輕鬆軟膏、醋酸氟氫可的鬆軟膏、醋酸曲安奈德軟膏、丙酸倍氯米鬆軟膏、地塞米松磷酸鈉滴眼液、哈西奈德乳膏等的鑑別試驗。