β-內醯胺類抗生素
本類抗生素包括青黴素族和頭孢菌素族，他們的分子結構中均含有β-內醯胺環。
基本結構：
分子中都有一個游離羧基和醯胺側鏈。
青黴素：β-內醯胺環和氫化噻唑環
頭孢菌素：β-內醯胺環和氫化噻嗪環
性質：
溶解度：青黴素和頭孢菌素分子中的游離羧基具有相當強的酸性，能與無機鹼或某些有機鹼形成鹽。其鹼金屬鹽易溶於水，而有機鹼鹽難溶於水，易溶於甲醇等有機溶劑。
鏇光性：青黴素族分子中含有三個手性碳原子，頭孢菌素族含有兩個手性碳原子，都具有鏇光性。
紫外吸收特性
青黴素分子中的母核部分無紫外吸收，但出側鏈醯胺基上r如具苯環共軛系統，則有紫外吸收特性。來源：考試大
頭孢菌素由於母核部分具有o-c=n-c=c結構，故有紫外吸收。
β-內醯胺環的不穩定性
β-內醯胺環是青黴素族結構最不穩定的地方，如與酸、鹼、青黴素酶、羥胺及某些金屬離子（銅、鉛、汞和銀）等作用時，易發生水解和分子重排，導致β-內醯胺環的破壞而失去活性。
鑑別試驗：
⑴鉀、鈉鹽的火焰反應
⑵呈色反應
①羥肟酸鐵反應：青黴素及頭孢菌素在鹼性中與羥胺作用，β-內醯胺環破裂生成羥肟酸，在稀酸中與高鐵離子呈色。
頭孢哌酮：紅棕色；氨苄西林：紫紅色；頭孢氨苄：紅褐～褐色；頭孢噻吩鈉：紅褐色；普魯卡因青黴素：紫紅色；頭孢唑啉鈉：紅棕色。
②硫酸—硝酸呈色反應：頭孢菌素能與硫酸—硝酸反應後成色。
頭孢噻吩鈉：紅棕色；頭孢氨苄：黃色；頭孢噻肟鈉：亮黃色。
③茚三酮反應：某些具有α-氨基的本類藥物（如氨苄西林）遇茚三酮即顯藍紫色。
④與斐林試劑反應：本類藥物具有類似肽鍵結構，可產生雙縮脲反應。開環分解，使鹼性酒石酸銅鹽還原顯紫色。阿莫西林、氨苄西林鈉可採用本法鑑別。
⑤變色酸—硫酸呈色反應：阿莫西林加變色酸-硫酸實際混合後，於150℃加熱2～3min，因分解除甲醛與變色酸縮合而呈深褐色。
⑥與重氮苯磺酸呈色反應：頭孢菌素族7位側鏈含有酚羥基基團時，能與重氮苯磺酸試液產生偶合反應，顯橙黃色。
⑦與銅鹽呈色：頭孢氨苄加醋酸、硫酸銅、氫氧化鈉試液後，生成銅配位鹽，顯橄欖綠色。
⑶沉澱反應
①在稀酸中生成白色沉澱：青黴素鉀和青黴素鈉加水溶解後，加稀鹽酸2滴，即析出難溶於水的游離基白色沉澱。此沉澱能在乙醇、醋酸戊酯、氯仿、乙醚或過量的鹽酸中成鹽。
②有機胺鹽的特殊反應
重氮化-偶合反應：普魯卡因青黴素水溶液酸化後，顯普魯卡因芳伯氨基的重氮化-偶合反應，生成偶氮染料紅色沉澱。來源：考試大
與三硝基苯酚的反應：苄星青黴素經氫氧化鈉鹼化後，用乙醚提取，蒸去乙醚後的殘渣含有二苄基乙二胺，加稀乙醇使殘渣溶解，加三硝基苯酚的飽和溶液，加熱後放冷，即析出二苄基乙二胺苦味酸結晶。
⑷光譜法
①紫外分光光度法
最大吸收波長鑑定法
水解產物的最大吸收波長鑑定法
②紅外吸收光譜
③核磁共振光譜
⑸色譜法
①薄層色譜法
②高效液相色譜法來源：考試大
含量測定
⑴碘量法（苄星青黴素）
青黴素或頭孢菌素分子不消耗碘，其降解產物消耗碘。
反應分兩步進行：第一步反應是按化學計算量進行；第二步青黴噻唑烷酸在酸性條件下被碘氧化的反應受溫度、ph、時間等諸多因素影響，故耗碘量沒有固定的量關係。因此試驗過程中要嚴格控制溫度，同時採用與青黴素標準品平行對照測定，則可抵消上述可變因素的影響。
碘與青黴噻唑酸的作用以ph4.5，溫度在24～26℃為最好。1摩爾青黴素能吸收8摩爾的碘,故本法的靈敏度較高。
注意：在滴定終點時放慢滴定速度，並強力振搖；如果滴定至終點又返現藍色，說明真正的終點尚未到達。
⑵汞量法（青黴素鈉、青黴素鉀）
青黴素分子不與汞鹽反應，而其鹼性水解產物青黴噻唑酸及繼續水解生成的青黴胺都能與汞鹽定量反應，根據消耗的汞鹽量可以計算青黴素的含量。
電位滴定法：指示電極：鉑電極；參比電極：汞-硫酸亞汞電極。滴定液：硝酸汞。
每1ml的硝酸汞滴定液（0.02mol/l）相當於7.128mg的總青黴素。
總青黴素的百分含量與降解產物的百分含量之差值即為青黴素的含量。來源：考試大
注意：青黴素含量計算以第二次滴定終點為依據；水解必須完全；空白試驗也要稱取供試品，但不經氫氧化鈉水解；與碘量法比較，汞量法測定青黴素的主要優點是不需要青黴素標準品作對照，汞鹽滴定液用edta標定即可。
⑶酸鹼滴定法（苯唑西林鈉）
⑷紫外-可見分光光度法
⑸高效液相色譜法