本法系將一定劑量的供試品，靜脈注入家兔體內，在規定時間內，觀察家兔體溫升高的情況，以判定供試品中所含熱原的限度是否符合規定。
供試用家兔
供試用的家兔應健康無傷，體重1.7～3.0kg，雌兔應無孕。預測體溫前7日即套用同一飼料飼養,在此期間內，體重應不減輕，精神、食慾、排泄等不得有異常現象。未經使用於熱原檢查的家兔；或供試品判定為符合規定,但組內升溫達0.6℃的家兔；或供試品判定為不符合規定,但其組內家兔平均升溫未達 0.8℃，且已休息兩周以上的家兔；或三周內未曾使用的家兔，均應在檢查供試品前3～7日內預測體溫，進行挑選。挑選試驗的條件與檢查供試品時相同，僅不注射藥液，每隔1小時測量體溫1次，共測4次,4次體溫均在38.0～39.6℃的範圍內,且最高最低體溫的差數不超過0.4℃的家兔,方可供熱原檢查用。用於熱原檢查後的家兔，如供試品判定為符合規定,至少應休息2日方可供第2次檢查用。如供試品判定為不符合規定，且其組內家兔平均升溫達0.8℃或更高時，則組內全部家兔不再使用。每一家兔的使用次數，用於一般藥品的檢查，不應超過10次。
試驗前的準備
在作熱原檢查前1～2 日，供試用家兔應儘可能處於同一溫度的環境中，實驗室和飼養室的溫度相差不得大於5℃，實驗室的溫度應在17～28℃,在試驗全部過程中，應注意室溫變化不得大於3℃，應避免噪音干擾。家兔在試驗前至少1小時開始停止給食並置於適宜的裝置中,直至試驗完畢。家兔體溫應使用精密度為±0.1℃的肛溫計，或其他同樣精確的測溫裝置。肛溫計插入肛門的深度和時間各兔應相同，深度一般約6cm，時間不得少於1分半鐘，每隔30～60分鐘測量體溫1次，一般測量2 次，兩次體溫之差不得超過0.2℃,以此兩次體溫的平均值作為該兔的正常體溫。當日使用的家兔，正常體溫應在38.0～39.6℃的範圍內，且各兔間正常體溫之差不得超過1℃。
試驗用的注射器、針頭及一切和供試品溶液接觸的器皿,應置烘箱中用250℃加熱30分鐘或用180℃加熱2小時，也可用其他適宜的方法除去熱原。
檢查法
取適用的家兔3隻,測定其正常體溫後15分鐘以內，自耳靜脈緩緩注入規定劑量並溫熱至約38℃的供試品溶液，然後每隔1小時按前法測量其體溫1次,共測 3次,以3次體溫中最高的一次減去正常體溫，即為該兔體溫的升高度數。如3隻家兔中有1隻體溫升高0.6℃或0.6℃以上,或3隻家兔體溫升高均低於 0.6℃,但升高的總數達1.4℃或1.4℃以上，應另取5隻家兔複試，檢查方法同上。
結果判斷
在初試3隻家兔中，體溫升高均低於0.6℃，並且3隻家兔體溫升高總數低於1.4℃；或在複試的5隻家兔中，體溫升高0.6℃或0.6℃以上的兔數僅有1隻,並且初試、複試合併8隻家兔的體溫升高總數為3.5℃或3.5℃以下,均認為供試品的熱原檢查符合規定。
在初試3隻家兔中,體溫升高0.6℃或0.6℃以上的兔數超過1隻；或在複試的5隻家兔中，體溫升高0.6℃或0.6℃以上的兔數超過1隻；或在初試、複試合併8隻家兔的體溫升高總數超過3.5℃，均認為供試品的熱原檢查不符合規定。