1.“做”，只能讀zuò;“作”，除讀zuò外，還可讀zuō(只有一個義項：作坊)。
2.“做”，只有動詞一種詞性;“作”，除作動詞外，還可作名詞，如傑作、成功之作、石料作等。
3.“做”與“作”都有“從事某種活動”、“寫作”、“裝”等義項，而“作”的“起”、“作品”、“當作”、“發作”、“作坊”等義項是“做”沒有的;“做”的“製造”、“舉行慶祝或紀念活動”、“充當，擔任”、“用做”、“結成”等義項是“作”沒有的。
同樣是“從事某種活動”，“作”多指從事不好的事，如作孽、自作自受、作案、作弊、作樂等;而“做”從事的一般與工作或職業有關，如做生意、做工、做事等。
同樣是“寫作”，“著作”就不能寫成“著做”，“作書(信)”就不能寫成“做書”;而在這個義項下能用“做”的地方都可以換成“作”。
同樣是“裝”，“做”更強調“假裝”，如做樣子。
4.組合成詞語時，雖然兩個字可同時搭配某些字，但使用情況和意思不同。如“作客”與“做客”，前者指寄居別處，後者指自己當客人;“作文章”與“做文章”，前者指學生練習文章，後者比喻抓住一件事發議論或在上面打主意。