篇一:實驗計畫書格式要求
廣醫生化技能大賽
實驗設計書格式要求 (A4紙)
一、排版
1、頁面設定:頁邊距上下左右各用2.4cm。
2、行距:全部採用1.5倍行距。
3、頁碼:每頁下端居中,全部採用阿拉伯數字排序,如1,2,3等,不要寫“第1頁”或“-1-”等。
4、頁眉:全部不加頁眉。
二、標題
1、實驗名稱(居中、三號宋體、加粗)
2、參賽者資料(居中、小四宋體):學院 年級專業 姓名 宿舍電話 手機號碼 (按字母排序)
三、摘要
1、“摘要”兩字用黑體加粗4號字居中,字與字之間留4個字距。摘要正文用宋體小4號字。
2、“關鍵字”三個字用黑體加粗小4號字,與摘要正文左對齊。
3、關鍵字宋體小4號字,各關鍵字之間空2個字距,且不加標點符號。
四、正文
(1、前言;2、實驗目的;3、實驗原理;4、實驗設備;5、實驗材料及試劑:a.試劑的配製b.材料的處理;6、實驗操作步驟;7、結果及計算;8、注意事項;9、費用預算)
1、正文層次標題題末不加標點符號。各層次一律用阿拉伯字連續編號,如:“1”,“2.1”,“3.1.2”,一律左頂格,後空一字距寫標題。一級標題從前言起編,一律用黑體加粗4號字,左頂格;二級標題用黑體加粗小4號字,左頂格;三級標題用楷體加粗小4號字,左頂格。
2、正文其他部分全部用宋體小4號字。
3、圖題放圖下方居中,用阿拉伯數字編號,如:圖1,圖號後不加任何符號,空1個字距寫圖題;表題放表上方居中,用阿拉伯數字編號,如:表1,表號後不加任何符號,空1個字距寫表題。
4、文中的拉丁學名採用右斜體字母。
五、參考文獻
1、“參考文獻”四字用黑體加粗4號字居中,字與字之間空1個字元。
2、中文參考文獻採用宋體小4號字,英文參考文獻採用Times New Roman小4號字。
六、附錄
如有附錄,放在參考文獻後。“附錄”兩字用黑體加粗4號字居中,字與字之間留4個字距。
檢驗系各位同學:
請於4月7日前將實驗設計書,報名表(通知書附屬檔案1)和作品信息匯總表打包發至我的信箱,檔案名稱為參賽作品題目+組長姓名,郵件名為生化+作品名+組長姓名, ,並於4月8日將實驗設計書和報名表的紙質版交給我,謝謝。
篇二:實驗策劃書
實驗一 水中氟化物的測定-離子選擇電極法
水中氟化物的含量是衡量水質的重要指標之一,生活飲用水水質限值為1.0mg/L。測定氟化物的方法有氟離子選擇電極法、離了色譜法、比色法和容量滴定法,前兩種方法套用普遍。本實驗採用氟離子選擇電極法測定游離態氟離子濃度,當水樣中含有化合態(如氟硼酸鹽)、絡合態的氟化合物時,應預先蒸餾分離後測定。
一、實驗目的和要求 1.掌握用離子活度計或pH計、電晶體毫伏計及氟離子選擇電極測定氟化物的原理和測定方法,分析干擾測定的因素和消除方法。
2.複習教材第二章中的相關內容;在預習報告中列出被測原電池,簡要說明測定方法原理和影響測定的因素。 二、儀器
1.氟離子選擇電極(使用前在氟離子內沖液中充分浸泡1-2h,膠塞拔掉)。 2.飽和甘汞電極(上面的膠塞拔掉,一共兩個)。
3.精密pH計或離子活度計、電晶體毫伏計,精確到0.1mv。 4.磁力攪拌器和塑膠包裹的攪拌子。 5.容量瓶:100mL、50mL。
6.移液管或吸液管:10.00mL、5.00mL。
7.燒杯:50mL、100mL。 8、試紙。 三、試劑
所用水為去離子水或無氟蒸餾水。 1.氟化物標準貯備液:稱取0.2210 g基準氟化鈉(NaF)(預先於105~110℃烘乾2 h或者於500~650℃烘乾約40 min,冷卻),用水溶解後轉入1000 mL容量瓶中,稀釋至標線,搖勻。貯存在聚乙烯瓶中。此溶液每毫升含氟離子100 μg。
2.乙酸鈉溶液:稱取15 g乙酸鈉(CH3COONa)溶於水,並稀釋至100 mL。 3.鹽酸溶液:2 mol/L。
4.總離子強度調節緩衝溶液(TISAB):稱取5.88 g二水合檸檬酸鈉和8.5 g硝酸鈉,加水溶解,用鹽酸調節pH至5~6,轉入100 mL容量瓶中,稀釋至標線,搖勻。
5.飲用水樣1,2。 四、測定步驟
1.儀器準備和操作
按照所用測量儀器和電極使用說明,首先接好線路,將各開關置於“關”的位置,開啟電源開關,預熱15min,調零,以後操作按說明書要求進行。
2.氟化物標準溶液製備 用氟化鈉標準貯備液、吸液管和100mL容量瓶製備每毫升含氟離子10μg的標準溶液。
3.標準曲線繪製
用吸液管取1.00、3.00、5.00、10.00、20.00 mL氟化物標準溶液,分別置於5隻50 mL容量瓶中,加入10mL總離子強度調節緩衝溶液,用水稀釋至標線,搖勻。分別移入100 mL聚乙烯杯中,放入一隻塑膠攪拌子,按濃度由低到高的
順序,依次插入電極,連續攪拌溶液,讀取攪拌狀態下的穩態電位值(E)。在每次測量之前,都要用水將電極沖洗淨,並用濾紙吸去水分。在半對數坐標紙上繪製E-lgcF-標準曲線,濃度標於對數分格上,最低濃度標於橫坐標的起點線上。
4.水樣測定
用無分度吸液管吸取適量(5ml)水樣,置於50 mL容量瓶中,用乙酸鈉或鹽酸溶液調節至近中性,加入10mL總離子強度調節緩衝溶液,用水稀釋至標線,搖勻。將其移入100 mL聚乙烯杯中,放入一隻塑膠攪拌子,插入電極,連續攪拌溶液,待電位穩定後,在繼續攪拌下讀取電位值(Ex)。在每次測量之前,都要用水充分洗滌電極,並用濾紙吸去水分。根據測得的毫伏數,由標準曲線上查得試液氟化物的濃度,再根據水樣的稀釋倍數計算其氟化物含量。
5.空白試驗
用去離子水(5ml)代替水樣,按測定樣品的條件和步驟測量電位值,檢驗去離子水和試劑的純度,如果測得值不能忽略,應從水樣測定結果中減去該值。 五、結果處理
1.繪製E(mV)-lg[F-]標準曲線。
2.計算水樣中氟化物的含量。
實驗數據記錄如下: 得:
分別將ΔE=-96和ΔE=-103帶入標準曲線,得 水樣一:lg(F-)=1.14 C(F-)=13.80 mg/L 水樣二:lg(F-)=1.28 C(F-)=19.05 mg/L
實驗二 水中鉻的測定
廢水中鉻的測定常用分光光度法,是在酸性溶液中,六價鉻離子與二苯碳醯二肼反應,生成紫紅色化合物,其最大吸收波長為540nm,吸光度與濃度的關係符合比爾定律。如果測定總鉻,需先用高錳酸鉀將水樣中的三價鉻氧化為六價,再用本法測定。
一、實驗目的和要求
1.掌握六價鉻和總鉻的測定方法;熟練套用分光光度計。
2.預習第二章第六節關於水和廢水中金屬化合物的測定原理和方法。 二、六價鉻的測定
(一)儀器
1.分光光度計,比色皿(1cm、3cm)。 2.50mL具塞比色管,移液管,容量瓶等。 (二)試劑
1.(1+1)硫酸(1體積水與1體積硫酸混合,硫酸往水中注入)。 2.(1+1)磷酸。
3.鉻標準貯備液:稱取於120℃乾燥2h的重鉻酸鉀(優級純)0.2829g,用水溶解,移入1000mL容量瓶中,用水稀釋至標線,搖勻。每毫升貯備液含0.100μg六價鉻。
4.鉻標準使用液:吸取5.00mL鉻標準貯備液於500mL容量瓶中,用水稀釋至標線,搖勻。每毫升標準使用液含1.00μg六價鉻。使用當天配製。
5.二苯碳醯二肼溶液(顯色劑):稱取二苯碳醯二肼(簡稱DPC,C13H14N4O)0.2g,溶於50mL丙酮中,加水稀釋至100mL,搖勻,貯於棕色瓶內,置於冰櫃中保存,顏色變深後不能再用。
(三)測定步驟
1.標準曲線的繪製:取9支50mL比色管,依次加入0、0.20、0.50、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00和10.00mL鉻標準使用液,用水稀釋至標線,加入(1+1)硫酸0.5mL和(1+1)磷酸0.5mL,搖勻。加入2mL顯色劑溶液,搖勻。5—10min後,於540nm波長處,用1cm比色皿,以水為參比,測定吸光度A並作空白校正。以吸光度為縱坐標,相應六價鉻含量為橫坐標繪出標準曲線。
2.水樣的測定:取5ml(含Cr6+少於50μg)待測水樣於50mL比色管中,用水稀釋至標線,測定方法同標準溶液。進行空白校正後根據所測吸光度從標準曲線上查得Cr6+含量。
(四)數據處理
式中:m——從標準曲線上查得的Cr6+量(μg);
V——水樣的體積(mL)。
實驗數據記錄如下:
水樣一:ΔA=0.002 帶入標準曲線得Cr6+=1.104×10-3 mg/L
水樣二:ΔA=0.003 帶入標準曲線得Cr6+=2.48×10-3 mg/L
(五)注意事項
1.用於測定鉻的玻璃器皿不套用重鉻酸鉀洗液洗滌。
2.Cr6+與顯色劑的顯色反應一般控制酸度在0.05—0.3mol/L(1/2H2SO4)範圍,以0.2mol/L時顯色最好。顯色前,水樣應調至中性。顯色溫度和放置時間對顯色有影響,在15℃時,5—15min顏色即可穩定。
3.如測定清潔地面水樣,顯色劑可按以下方法配製:溶解0.2g二苯碳醯肼於100mL95%的乙醇中,邊攪拌邊加入1+9硫酸400mL。該溶液在冰櫃中可存放一個月。用此顯色劑,在顯色時直接加入2.5mL即可,不必再加酸。但加入顯色劑後,要立即搖勻,以免Cr6+可能被乙酸還原。
實驗三 化學需氧量的測定(高錳酸鉀法)
在酸性條件下,高錳酸鉀具有很高的氧化性,本實驗採用酸性高錳酸鉀法,向被測水樣中定量加入高錳酸鉀溶液,加熱水樣,水溶液中多數的有機污染物都可以氧化,加入定量且過量的草酸鈉還原過量的高錳酸鉀,最後再用高錳酸鉀標準滴定溶液返滴過量的草酸鈉至微紅色為終點,由此計算出水樣的耗氧量。 一、實驗目的和要求
1.初步了解環境分析的重要性及水樣的採集和保存方法
2.對水樣中耗氧量COD與水體污染的關係有所了解 3.掌握高錳酸鉀法測定水中COD的原理及方法 二、實驗原理 測定時,在水樣中加入硫酸及一定量的高錳酸鉀,置沸水浴中加熱使其中的還原性物質氧化,剩餘的高錳酸鉀用一定量過量的草酸鈉還原,再以高鞥酸鉀標準溶液返滴草酸鈉過量部分。在煮沸過程中, KmnO4 和還原性物質作用:
4MnO4 - + 5C + 12H+ = 4Mn2+ + 5CO2 + 6H2O
剩餘的 KmnO4 用 Na2C2O4 還原:
2MnO4 - + 5C2O42- + 16H+ = 2Mn2+ +10CO2 + 8H2O 再以高錳酸鉀返滴草酸鈉過量部分,通過實際消耗高錳酸鉀的量來計算水中還原性物質的量。
三、主要試劑
0.002mol/L KmnO4 、 0.005mol/L Na2C2O4 、1:3H2SO4 四、實驗步驟
1.0.005mol/L Na2C2O4 標準溶液的配製
篇三:實驗計畫書
實驗計畫書(初定)
此為初步計畫書,還有很多不成熟甚至錯誤之處 x年xx月號 ,望老師給予指出!
本實驗總體上分為三大步。(1)生理實驗部分:本部分主要進行papaya硬度和細胞壁相關酶類活性的測定。(2)分子實驗部分:本部分主要是獲得papaya細胞壁相關酶類的基因序列以及由RNA差異表達譜獲得細胞壁代謝酶基因等的表達特徵。(3)驗證實驗部分:本部分主要通過實時螢光定量PCR的方法(Real time Q-PCR)驗證並初步確定與“橡皮化”相關的細胞壁代謝酶基因的家族成員。
生理實驗部分是第一步需要實施的,也是比較獨立的部分,初步定為40天左右的時間結束。分子實驗和驗證實驗部分是本實驗的核心,這兩部分緊密結合,需要同步進行,首先是各種樣本(CK,ETH,1-MCP)的獲得,隨後是各樣本的RNA提取,然後委託深圳華大基因公司進行轉錄組測序並從轉錄組中篩選細胞壁代謝相關的基因序列,採用5RACE及3RACE的方法,獲得這些基因的全長序列以及構建差異表達譜進行相關差異基因篩選等生物信息分析,最後通過實時螢光定量PCR的方法(Real time Q-PCR)驗證並初步確定與“橡皮化”相關的細胞壁代謝酶基因的家族成員。
一,買果。
二,采後預處理:
采後立即運回實驗室,剔除病果和機械損傷果,選用形狀、大小、外觀顏色相對一致的番木瓜果實,剪留0.5cm長果柄為實驗材料。先用1.0 g/L的次氯酸鈉溶液洗果10 min,再用0.5g/L的施保功溶液浸泡果實10 min,取出晾乾後備用。
三,樣品分組(四組):
1.對照組:果實用PE(聚乙烯)保鮮袋包裝,輕綁袋口,置於低溫(15℃)的恆溫箱中貯藏。
2.1.0μl/L的1-MCP處理(橡皮化果實):在室溫條件下(25℃),用濃度1.0μl/L的1-MCP密閉熏蒸處理果實24 h,取出果實後用PE保鮮袋包裝,輕綁袋口,置於15℃(冷藏)、RH(相對濕度)為90%的條件下貯藏。
3.0.5 g/L的乙烯利處理:在室溫條件下(25℃),用濃度0.5 g/L的乙烯利處理果實3分鐘,取出果實後用PE保鮮袋包裝,輕綁袋口,置於15℃(冷藏)、RH為90%的條件下貯藏。
四,實驗過程:
貯藏過程中每隔2d(催熟果實)和5d取樣一次,鮮果或-70℃貯存,為以後進行基因表達水平的研究。
取樣的同時,進行以下生理指標的測定:
1.果實硬度:
使用果實硬度計(FHM-1型,日本產)進行測定。
2.PG(多聚半乳糖醛酸酶)活性:
稱取1g果肉,加入5mL(先加3 mL,後用2mL沖洗) 0.05mol/L,pH4.6的檸檬酸緩衝液低溫存放(含5%NaCl和1.8 mM的EDTA(乙二胺四乙酸)),冰浴研磨勻漿。然後在10000轉離心30min,將上清液進行透析,用0.05mol/L,pH4.6的檸檬酸緩衝液作為透析液,透析液不含EDTA和NaCl。透析條件:4℃條件下放24小時,中間換一次緩析液,透析完的溶液用於酶活力的測定。該操作在冰浴下進行。
PG活性測定:PG 活性測定以1% 多聚半乳糖醛酸 (PGA , 美國Sigma 公司) 為底物, 反應混合液為:1% PGA0.5 mL、醋酸鈉緩衝液(pH 4.6)1.5 mL、酶提取液0.5 mL, 0.5 mL的水(總反應體系為3mL), 40 ℃反應60 min, 立即加入1mLDNS (3, 5-二硝基水楊酸)終止反應。再加入沸水中煮沸10 min 後冷卻,于波長540 nm 下定量分析酶水解生成的半乳糖醛酸含量。以3mL蒸餾水+1 mLDNS作為對照(CK)。以每小時釋放1mg 的D-半乳糖醛酸(美國Sigma 公司) 為1 個酶活性單位(U)。以標準D-半乳糖醛酸繪製標準曲線。試驗重複3 次。對照不加酶液,以緩衝液代替。
3.PME(果膠甲酯酶)酶活性:
取2g果肉,加3mL 預冷的1 mol/L NaCl 和2 g PVP(聚乙烯基吡咯烷酮)置於研缽中,充分研磨後,轉移到離心管中,再用2mL NaCl潤洗,倒入離心管中,於冰浴中放置1小時,每隔20 min震盪一次,在4℃下,10000轉離心30 min,收集上清液,用0.01 mol/L NaOH調
至pH為7.5, 於4℃保存備用。測定:在試管中依次加入1.5mL 0.5% (w/v)的果膠放冰櫃備用,有效期5天、0.5 mL0.01%溴麝香酚蘭指示劑棕色瓶(pH為7.5),1.0 mL水,0.5 mL酶液(酶液最後加入),總反應體系為3.5 mL 。立即將試管放入37℃的水浴鍋中30 min,以蒸餾水為CK。取出試管後冷卻,迅速測定其在620 nm波長一分鐘內的變化。以每min變化0.01為一個活力單位(U),以U/ g.FW表示。
4.纖維素酶(CX):
取0.625g羧甲基纖維素鈉溶於0.2 mol/L(pH為4.6)的醋酸鈉緩衝液中,加幾滴氫氧化鈉調PH值到7.0,放低溫下溶解,定容至100 mL。
酶液的製備同PG。
活性測定:反應體系為1 mL CMC(羧甲基纖維素鈉)溶液,酶液1 mL,醋酸鈉緩衝液(pH 4.6)1.0 mL(總反應體系為3mL),40 ℃保溫60 min,取出加入3,5一二硝基水楊酸(DNS)1 mL終止反應;加入沸水中煮沸5 min,冷卻後用分光光度計在540nm處比色測定吸光度值。以3mL蒸餾水+1 mLDNS作為對照(CK)。每小時由底物生產1μmol葡萄糖所需的酶量定義為一個酶活力單位(U)。
纖維素酶活力(U/g)=〔葡萄糖含量(mg)×酶液提取總體積(mL)×5.56〕/〔反應液中酶液加入量(mL)×樣品重(g)×時間(h)〕 式中5.56——1 mg葡萄糖的微摩爾數(1000/180=5.56);
用3, 5-二硝基水楊酸測定生成的葡萄糖做標準曲線。
5.內切木聚糖酶活性:
篇四:試驗方案與試驗計畫書
第三章 試驗方案與試驗計畫書
知識目標:
● 學會田間試驗方案的制訂方法; ● 掌握田間試驗計畫書的書寫格式。
技能目標:
● 學會制訂田間試驗方案的技能; ● 學會制訂田間試驗計畫書的技能。 第一節 制訂田間試驗方案方法
田間試驗計畫是試驗實施的依據,更是試驗成敗的關鍵。
田間試驗實施是把試驗計畫具體實施。主要包括試驗地的選擇、田間區劃、試驗材料準備、播種或移栽、田間管理、觀察記載與測定、收穫和測產等。
任何田間試驗的全過程,包括選題與設計,布置與種植,管理與觀察,收穫與測產,以及總結與推廣,所有這些工作就是田間試驗的實施。要搞好田間試驗,必須做好田間試驗全過程的所有環節。如果試驗中某一個環節沒有做好,試驗就會失敗。因此,在田間試驗實施中,必須以認真、仔細、精益求精的態度進行工作。
一、試驗方案的設計方法
1.單因素試驗方案
單因素試驗方案設計一般由試驗因素的若干水平加適當對照處理即可。其設計要點是確定因素的水平範圍和水平間距。水平範圍是指試驗因素水平的上、下限範圍,其大小取決於研究目的及試驗研究的深入程度。水平間距是指因素相鄰水平間的級差,水平間距要適當,過大沒有實際意義,過小試驗效果易被誤差掩蓋,試驗結果不能說明問題。例如在育種試驗中,將新育成的若干品種與原有品種進行比較以測定其改良的程度,此時,品種是試驗的唯一因素,各育成品種與原有品種即為各個處理水平,在試驗過程中,除品種不同外,其他環境條件和栽培管理措施都應嚴格控制一致。又例如為了明確某一品種的耐肥程度,施肥量就是試驗因素,試驗中的處理水平就是幾種不同的施肥量,品種及其他栽培管理措施都相同。表3-1大豆鉀肥用量試驗方案即為單因素試驗方案。
表3-1大豆鉀肥施用量試驗方案
處理號 1 2 3 4
處理名稱 對照 低鉀 中鉀 高鉀
鉀肥用量(kg/hm2)
0 50 100 150
2.復因素試驗方案
生物體生長受到許多因素的綜合作用,採用復因素試驗,有利於探究並明確對生物體生長有關的幾個因素的效應及其相互作用,能夠較全面地說明問題。復因素試驗的效率常高於單因素試驗。復因素試驗方案設計常有兩種類型,一是全面實施方案,二是不完全實施方案。
(1)全面實施方案 其方案設計要點是:所有試驗因素在試驗中處於完全平等的地位,每個因素的每個水平都與另外因素的所有水平相互配合構成試驗處理組合。全面實施方案是最常用較簡單的復因素試驗方案,其優點是因素水平能均衡搭配。下面以大豆播期和氮肥用量二因素三水平試驗方案設計為例說明,試驗因素及水平見表3-2,試驗方案見表3-3。
表3-2大豆播期、氮肥用量試驗因素水平
試驗水平
1 2 3
試驗因素
播期 5月10日 5月20日 5月30日
表3-3大豆播期、氮肥用量全面實施試驗方案
處理號 1 2 3 4 5 6 7 8 9
播期 5月10日 5月10日 5月10日 5月20日 5月20日 5月20日 5月30日 5月30日 5月30日
氮肥用量(kg/hm2)
50 100 150 50 100 150 50 100 150
氮肥用量(kg/hm2)
50 100 150
表3-3試驗方案中,處理組合的確定方法是,先由播期的1水平(5月10日)分別與氮肥用量的3個水平配合,得到1、2、3三個處理組合;再由播期的2水平(5月20日)分別與氮肥用量的3個水平配合,得到4、5、6三個處理組合;最後由播期的3水平(5月30日)分別與氮肥用量的3個水平配合,得到7、8、9三個處理組合。這樣就得到上述3×3全面實施試驗方案。如果因素過多,試驗規模很大,往往難以全面實施。
(2)不完全實施方案 由全面實施方案的一部分處理構成試驗方案,稱為不完全實施方案。不完全實施方案多採用正交設計、正交回歸設計、旋轉回歸設計、最優設計等設計方法來制訂。其設計方法可參看相關書籍。
制訂試驗計畫前,要先確定田間試驗課題。在選擇和確定田間試驗課題時,必須從生產需要出發。一般應根據農業生產發展需要提出來的研究任務、本地區生產過程要解決的問
題、存在著爭執的生產問題及國內外其他地區的先進經驗來確定試驗課題。
二、制訂試驗方案原則
擬訂一個正確有效的試驗方案,要包含以下幾個方面的原則:
1.首先應該回顧以往的研究進展,通過調查交流、文獻索引等來明確試驗目的,形成對所研究的主題及其外延的構想,使待擬訂的試驗方案能針對主題確切而有效地解決問題。
2.根據試驗目的確定供試因素及其水平
供試因素一般不宜過多,應該抓住1~2個或少數幾個主要因素來解決關鍵性問題。每個因素的水平數目也不宜過多,且各水平間距要適當,使各水平能有明確區分,並把最佳水平範圍包括在內。如果涉及試驗因素多,一時難以取捨,或者對各因素最佳水平的可能範圍難以作出估計,這時可以將試驗分為兩階段進行,即先做單因素的預備試驗,通過拉大幅度進行初步觀察,然後根據預備試驗結果再精細選取因素和水平進行正規試驗。預備試驗常常採用較多的處理數,較少或不設重複;正規試驗則精選因素和水平,設定較多的重複。為了不使試驗規模過大而失控,試驗方案原則上應力求簡單。
3.試驗方案中應包括對照
品種比較試驗中,常常統一規定同一生態區域內使用的對照品種,以便作為各試驗單位共同的比較標準。
4.擬訂試驗方案時,必須正確處理試驗因素及試驗條件間的關係
一個試驗中只有供試因素的水平在變動,其他因素都保持一致,固定在某一個水平上。根據互動作用的概念,在一種條件下某試驗因子的最優水平,換了一種條件,便可能不再是最優水平,反之亦然。這在品種試驗中最明顯。因而在擬訂試驗方案時必須做好試驗條件的安排,絕對不要以為強調了試驗條件一致性就可以獲得正確的試驗結果。例如品種比較試驗時要安排好密度、肥料水平等一系列試驗條件,使之具有代表性和典型性。由於單因素試驗的試驗條件必然有局限性,可以考慮將某些與試驗因素可能有互作(特別負互作)的條件作為試驗因素一起進行復因素試驗,或者同一單因素試驗在多種條件下分別進行試驗。
第二節 田間試驗計畫書
試驗課題確定後,在進行試驗之前,應制訂一份文字計畫,叫試驗計畫,試驗計畫是試驗的根據,有了試驗計畫,才能將試驗目的、要求明確地記載下來和表達出來,試驗進行才有依據,才能有條不紊地做好一切準備工作,才能使每個參加試驗的人行動一致,才能使其他有關人員對試驗提出寶貴的意見。因此,任何一個田間試驗必須擬訂試驗計畫,且要在試驗開始前一、二個月或更早時間進行擬訂。為使試驗計畫擬訂的科學合理和參試人員都能比較深刻地理解試驗目的、要求和方法。所有參試人員,都應參加擬訂試驗計畫。計畫確定後,每個參試人員都應遵守和執行計畫的規定,不得私自隨便更改。如果在執行中發現計畫中有遺漏的地方或由於條件的變化,原計畫有不適應的地方,也必須經過大家討論後,才能修改。
一、擬訂田間試驗計畫書的要求
擬訂一個正確有效的試驗計畫書,應遵循以下基本要求:
1.目的明確
擬訂試驗計畫書前應通過回顧以往研究進展,通過調查交流、文獻檢索等明確試驗目的,形成對所研究主題及其外延的構想,使待擬訂的試驗方案能針對主題,確切而有效地解決問題。
2.處理適當
根據試驗目的確定供試因素及其水平。供試因素一般不宜過多,應該抓住1~2個或少數幾個主要因素解決關鍵性問題。每個因素的水平數目也不宜過多,且各水平間距要適當,使各水平能有明確區分,並把最佳水平範圍包括在內。
3.嚴密的可比性
一般試驗採用差異比較來確定試驗因素的效應。為了保證試驗結果的嚴密可比性,在設計試驗方案時必須遵循如下原則:
(1)唯一差異原則 在試驗中,除了要研究的因素設定不同的水平外,其餘因素均應保持相對一致,以排除非試驗因素的干擾。例如根外噴施磷肥的試驗方案中如果設噴磷(A)與不噴磷(B)兩個處理,則兩者間差異含有磷的作用,也有水的作用,這時磷和水的作用混雜在一起解析不出來。若加入噴水(C)處理,則磷和水的作用可分別從A與C及B與C的比較中解析出來,因而可進一步明確磷和水的相對重要性。
(2)設定對照 農業試驗中常以常規的農藝措施為比較的基準,這個比較的基準就是對照。肥料試驗中,常以不施肥處理作為空白對照。品種比較試驗中常統一用同一生態區域內使用的標準(對照)種,以便作為各試驗單位共同的比較標準。
4.試驗的高效性
復因素試驗提供了比單因素試驗更多的效應估計,具有單因素試驗無可比擬的優越性。但當試驗因素增多時,處理組合數迅速增加,要對全部處理組合進行全面試驗,規模過大,往往難以實施,因而復因素試驗的套用常常受到限制。
二、田間試驗計畫書的內容
1.試驗名稱、時間與地點
要求能反映出這一試驗的主要內容,如“大豆穴播與品種分枝力關係的研究”。有時也常在課題名稱中反映出這一試驗的時間、負責進行的單位與地點或將時間、單位與地點寫在題目下面。
2.試驗目的、依據及預期的試驗結果 試驗必須有明確的目的。豐產栽培試驗的主要目的是要達到一定產量指標。因此,在試驗計畫中應寫明要達到的產量指標。如果是對比試驗,就要寫上進行這項試驗要解決什麼問題。有的試驗在寫試驗目的時,還同時提出試驗的根據,試驗目前的研究成果,發展趨勢及預期成果。如大豆穴播與品種分枝力關係的研究試驗目的“大豆機械穴播具有高產、鏟地省工、播種省籽等優點,深受廣大農民歡迎,栽培面積不斷擴大,已經列為黑龍江省大豆三種主要栽培模式之一。不同的播種方法由於植株密度和分布的不同,對品種性狀要求便不盡相同。過去有些農業科技人員認為:穴播大豆因為種植密度小,要求植株繁茂分枝力強的品種;也有的人認為穴播大豆由於每穴植株比較集中,適合種植主稈發達,分枝力弱的品種。為了明確大豆穴播與品種分枝力的關係,才進行了這一試驗,為穴播大豆進行品種選擇和育種單位制定育種目標提供科學依據”。試驗目的一定要寫得明確,能真實地反映對試驗的具體要求,使大家一看就知道這一試驗為什麼做,預期能達到什麼結果。文字要求簡明扼要,可以分條說明。
3.試驗材料
寫明供試土壤、供試作物和試驗材料等。 4.試驗處理方案
試驗方案是全部試驗工作的核心。它是根據試驗目的要求,經過精密考慮,仔細討論後被提出來的。本試驗要採用幾個處理,要在試驗計畫中寫清楚,有對照處理的,要把對照處理明確寫明。
5.試驗設計方法與內容
包括小區面積、長寬比例、重複次數及排列方法等。據此可作出田間試驗布置圖。根據田間布置圖,在已準備好的試驗地上布置試驗的各個處理小區。
6.整地、播種或移栽、施肥及田間管理措施
主要有整地方法、耕翻深度,施肥數量、種類、時期和方法,播種時期、方法和密度,灌溉次數、時期;中耕除草、防治病蟲害以及其他管理等。
7.田間觀察記載和室內考種、分析測定項目及方法。
8.收穫計產方法
9.試驗資料的統計方法和要求(參考第七章) 10.試驗地面積、試驗經費、人力及主要儀器設備
試驗應根據勤儉的原則,在不影響完成試驗的前提下,充分利用現有設備,節約各種物資材料。如果必須增添設備、人力、材料,應當將需要的名稱、數量、金額等詳細寫在計畫書上,以便早作準備如期解決,防止影響試驗的順利進行。
11.項目負責人、執行人
12.附田間試驗布置圖及各種記載表
根據田間試驗方案的具體要求,結合供試驗使用的土地形狀及土壤肥力趨向,具體設計小區面積、長寬比例、重複次數及排列方法等,把這些要素設計繪製成圖紙即成為田間試驗布置圖。在田間試驗布置圖上應根據既定的標準,按實際比例尺繪製試驗區各個重複、小區、走道和保護行等內容,標明不同處理排列的位置以及試驗區周圍的環境狀況,圖上還應註明方位和邊界,以便田間區劃、播種管理和田間觀測記載時能按圖行事。試驗布置圖除必須考慮小區、保護行設定外,還應設定走道。一般小區相連種植,每個小區扣除邊行後得實際計產面積,邊行寬度多為0.5m,其試驗布置圖如圖3-1。
道
路
圖3-1 田間試驗布置圖(單位:米,比例尺1:500)
一份試驗計畫除要包括以上各項主要內容外,有時為了說明與本試驗有關的基本情況,說明提出試驗根據和進行本項試驗的意義,還可以在試驗計畫開頭加上一段類似序言的說明文字。有些試驗所用的方法比較特殊,應在計畫中加上一項試驗方法。有些試驗還包括一些輔助性試驗,如盆栽試驗、室內分析等,應在計畫上列出有關項目。有些試驗不只是在一個地方進行,應當在計畫上列出試驗地點,以及各試驗點供試地段的基本情況,如地勢、土壤情況、前作以及其他等。如果同一試驗由幾個單位、幾個人共同負責,同時又有明確分工,也應當在試驗計畫上寫明這些情況,或者在計畫上加上組織領導一項。總之,為保證試驗順利進行,各項規定都應寫在計畫上。但也要求簡明扼要,條理清晰,可寫可不寫的就不要寫,能夠用表格形式表達的,儘量採用表格。
三、田間試驗計畫書格式
1.封面 寫明試驗名稱、計畫書編制者或編制小組名稱以及設計時間等。 2.選題依據及試驗目的要求 3.試驗材料和試驗地條件 4.試驗方法
篇五:實 驗 計 劃 書
實 驗 計 劃 書
題目:巴氏桿菌的分離及鑑定實驗方案
組數:第三組
組長:李揚帆
組員:蘇曉娟 王逸涵 海旭南 孫春亮 劉長寶 劉珊 陳紅 劉明超 盧寧 年級:08級
專業:動物醫學專業
實驗目的:
(1)掌握多殺性巴氏桿菌分離的基本要領和方法
(2)掌握多殺性巴氏桿菌培養的原理和方法
(3)掌握有關多殺性巴氏桿菌的生化試驗
(4)通過多殺性巴氏桿菌的分離與鑑定,掌握大腸桿菌的分離和鑑定程式,由此推廣到生產實踐的套用中去。
試劑:
瓊脂、牛肉膏、蛋白腖、葡萄糖、乳糖、氯化鈉、吲哚試劑、草酸銨結晶紫,革蘭氏碘液,95%酒精,石炭酸復紅,蒸餾水,生理鹽水,二甲苯,香柏油,1%中性紅水溶液,無菌的脫纖綿羊或家兔鮮血,靛基質試劑,3%過、膽鹽、枸櫞酸鹽、蔗糖、酵母膏、硫代硫酸鈉、0.4%酚紅水溶液、磷酸氫二鉀 實驗器材:
滅菌的手術刀,鑷子,刀片,玻璃皿、染液缸、接種環、試管夾、載玻片、擦鏡紙、濾紙、顯微鏡、酒精棉、超淨工作檯、恆溫箱、高壓滅菌鍋、試管、培養皿、接種針、漏斗、鐵架台、玻璃棒等。
病料採集:
取巴氏桿菌致死的小鼠,腹部向上固定於蠟盤上,用酒精棉球消毒體表,打開腹腔,暴露肝臟,用剪刀在火焰燒灼滅菌,在肝臟表面燙之殺死表面雜菌,隨即在灼燒部位刺一小孔,用滅菌接種環深入灼燒部位小孔中,將接種棒輕輕旋轉2次,藉以達到取足採料的目的。
塗片染色鏡檢:
美蘭染色: 巴氏桿菌致死的小鼠,肝臟或脾臟觸片,或心血塗片,以鹼性美蘭液或瑞氏染色液染色,如發現典型的兩極著色的短桿菌
革蘭氏染色:巴氏桿菌致死的小鼠,肝臟或脾臟觸片,或心血塗片,革蘭氏染色陰性
分離培養鑑定:
增菌培養:
血清肉湯培養基:在血清肉湯中培養,開始輕度渾濁,4-6d後液體變清朗,管底出現黏稠沉澱,振搖後不分散,表面形成菌環。
分離培養:
①取巴氏桿菌致死的小鼠,腹部向上固定於蠟盤上,用酒精棉球消毒體表,打開腹腔,暴露肝臟,用剪刀在火焰燒灼滅菌,在肝臟表面燙之殺死表面雜菌,隨即在灼燒部位刺一小孔,用滅菌接種環深入灼燒部位小孔中,將接種棒輕輕旋轉2次,藉以達到取足採料的目的。
②在血液平板上劃線培養,37℃培養24h,觀察菌落形態、大小、溶血狀況等。多殺性巴氏桿菌在血液平板上長成淡灰色、圓形、濕潤、露珠樣小菌落。 ③挑取疑似菌落4-6個:分別作以下實驗
Ⅰ用血瓊脂平板進行分離培養,血液平板上長成淡灰色、圓形、濕潤、露珠樣小菌落,無溶血現象, 革蘭氏染色為陰性球桿菌
Ⅱ用麥康凱瓊脂進行分離培養,麥康凱培養基上不生長
Ⅲ將此菌接種在三糖鐵培養基上可生長,並使底部變黃。
④多殺性巴氏桿菌的純培養
細菌生化試驗:
(1)甲基紅試驗(MR試驗):
原理:細菌分解葡萄糖產酸,使培養液呈酸性,滴加甲基紅試劑呈紅色。 方法:細菌接種於葡萄糖蛋白腖水培養基
結果:陽性反應:呈紅色 陰性反應:無變化
(2)吲哚試驗(靛基質試驗)
原理:細菌分解色氨酸產生靛基質,與靛基質試劑結合形成紅色的化合物而呈色。 方法:細菌接種於蛋白腖水培養基,37℃培養2-3天,沿試管壁緩慢加入靛基質試劑,靜置5分鐘,觀察結果
結果:陽性反應:紅色環狀物 陰性反應:無變化
(3)氧化酶試驗:陽性
加2-3滴試劑於濾紙上,用牙籤挑去一個菌落到紙上塗布,觀察菌落的反應。陽性反應在5-10s內有粉紅到黑色,15min後可出現假陽性反應。 用95%酒精配製的1%的
(4)觸酶試驗:陽性
將3%過氧化氫在載玻片上,挑菌觀察有無氣泡產生即可。陽性反應者有氣泡,無則為陰性。
(5)VP試驗:陰性
取24h的純培養物,接種於葡萄糖蛋白腖水培養基中,置於37℃培養48-72小時,取出後在培養基中先加入VP試劑甲液0.6ml,再加入乙液0.2ml。靜止在試管架上,15min後培養液呈紅色者為陽性。
(6)糖發酵試驗:
原理:細菌分解糖產酸使培養液呈酸性,指示劑表現呈色反應。
方法:細菌接種於糖發酵管內,37℃培養24小時,觀察結果。結果觀察:培養基為黃色者,記為+;變黃且產氣泡者,記為(+);否則記為-
葡萄糖發酵管,乳糖發酵管,蔗糖發酵管,果糖發酵管,麥芽糖發酵管,各兩個 結果:陽性反應:從藍紫色變為黃色 陰性法應:仍呈藍紫色
(7)明膠穿刺試驗:
取純培養物穿刺接種至半固體瓊脂培養基,穿刺線應在培養基中間,直至管底,拔出時應原路返回。結果說明:若該菌有鞭毛,能運動,則部分或全部半固體瓊
脂變渾濁。不運動者只在穿刺線上生長。
(8)抑菌試驗
取菌,用棉簽用棉簽緻密接種於血清瓊脂平板上,用無菌鑷子將各種抗菌藥物圓紙片,分別貼於培養基表面,各片距離要相等。37度培養24h,觀察結果。 血清學鑑定
毒力因子檢測及抗原鑑定:
取純培養物用0.5%氯化鈉溶液洗下製成濃菌液,並分成2份。一份經100度加熱1小時(如仍有不凝集性,則在121度下處理2小時)。另一份用0.5%福馬林37度作用24~48小時。分別用各種抗O血清和抗OK血清對上述菌液做玻板凝集實驗。如該菌株含K抗原,則各種抗O血清不能使福馬林處理的菌液凝集,但可被各種抗OK血清中的一種凝集。經100度或者121度加熱的菌液可被一種抗O血清凝集,但可能與別的抗O血清發生交叉凝集,可用試管凝集法按凝集效價來排除。H抗原一般不做鑑定。
試驗項目分配