醫院內感染的發生必須具備三個基本條件，即感染源、傳播途徑和易感宿主，同時存在並相互聯繫就構成感染鏈，導致感染。
（一）感染源 感染源即感染的來源，指病原微生物自然生存、繁殖及排出的場所或宿主（人或動物）。引起醫院內感染的感染源主要有：
1．已感染的患者及病原攜帶者
2．患者自身
3．動物感染源
4．環境儲源
（二） 傳播途徑 傳播途徑是指病原體從感染源傳到新宿主的途徑和方式。主要傳播途徑有：
1．接觸傳播 是外源性感染的主要傳播途徑。
（1）直接接觸傳播：由已感染的個體直接將病原體傳給易感宿主，如母嬰間皰疹病毒、沙眼衣原體、柯薩奇病毒等的傳播感染。
（2）間接接觸傳播：病原體通過媒介傳遞給易感宿主。最常見的傳播媒介是醫生和護士的手，還有共同媒介物（如水、食物、醫療設備）及生物媒介（如昆蟲）。
2．空氣傳播 空氣傳播是以空氣為媒介，在空氣中帶有病原微生物的微粒子，隨氣流流動，而造成感染傳播。空氣傳播有三種形式
（1）飛沫傳播：從感染源排出的液滴較大，在空氣中懸浮時間不長，只在易感者或患者近距離接觸時才發生感染。
（2）飛沫核傳播：從感染源傳出的飛沫，在降落前，表層水分蒸發，形成含有病原體的飛沫核，能長時間浮游，長距離傳播。
（3）菌塵傳播：物體表面上的傳染性物質乾燥後形成帶菌塵埃，通過吸入或菌塵降落於傷口，引起直接感染；或菌塵降落於室內物體表面，引起間接傳播。
3．注射、輸血傳播 通過污染的藥液、血液、傳播乙型和C型肝炎病毒、愛滋病病毒、瘧原蟲等。
4．飲水、食物傳播 除可致醫院內細菌性食物中毒外，食品中常帶有各種條件致病菌，可在患者腸道定植，增加感染機會。
5．生物媒介傳播 指動物或昆蟲攜帶病原微生物作為人群間傳播的中間宿主。如蚊子傳播瘧疾、乙型腦炎等。
（三） 易感宿主 易感宿主是指對感染性疾病缺乏免疫力而易感染的人。若把易感者作為一總體，則稱易感人群。