(1) 磷酸鹽緩衝液(0.2mol/l)
取磷酸氫二鈉71.64g,加水使溶解成1000ml,作為甲液。另取磷酸二氫鈉27.60g,加水使溶解成1000ml,作為乙液。取甲液81ml與乙液19ml,混勻,調節ph值至7.3。
(2) 磷酸鹽緩衝液(0.1mol/l)
取磷酸鹽緩衝液(0.2mol/l)500ml,加水稀釋成1000ml,調節ph值至7.3。
(3) 磷酸鹽緩衝液(0.02mol/l)
取磷酸鹽緩衝液 (0.2mol/l) 100ml,加水稀釋成1000ml,調節ph值至7.3。
(4) 琥珀酸鹽溶液
取琥珀酸與氫氧化鉀各4.72g,加水使溶解成100ml,調節ph值至7.3。
(5) 氰化鉀溶液 取氰化鉀0.65g,加水使溶解成100ml後,用稀硫酸調節ph值至7.3。
(6) 去細胞色素c的心懸浮液
取磷酸鹽緩衝液(0.2mol/l)5ml、琥珀酸鹽溶液1.0ml與供試品溶液0.5ml(如系還原型製劑,應加入0.01mol/l鐵氰化鉀溶液0.05ml),置25ml具塞比色管中,加去細胞色素c的心懸浮液0.5ml與氰化鉀溶液1.0ml,加水稀釋至10ml,搖勻,以同樣的試劑作空白,照分光光度法(附錄ⅳ a),在550nm的波長處附近,間隔0.5nm找出最大吸收波長,並測定吸收度,直至吸收度不再增大為止,作為酶還原吸收度;然後各加連二亞硫酸鈉約 5mg,搖勻,放置約10分鐘,在上述同一波長處測定吸收度,直至吸收度不再增大為止,作為化學還原吸收度;按下式計算。
酶還原吸收度
細胞色素c活力=───────────×100%
化學還原吸收度