2005《中國藥典》青黴素v鉀含量測定項下：
色譜條件與系統適用性試驗：用葡聚糖凝膠g- 10（40～120μm）為填充劑，玻璃柱內徑1.3～1.6cm，柱高30～40cm；以ph7.0磷酸鹽緩衝溶液（0.1mol/l磷酸氫二鈉溶液- 0.1mol/l磷酸二氫鈉溶液）（61：39）為流動相a，以水為流動相b；流速為每分鐘1.5ml；檢測波長為254nm。理論板數按藍色葡聚糖 2000峰不低於700。青黴素v鉀片和青黴素v鉀膠囊的含量測定方法同青黴素v鉀。
文獻報導的方法：
丁紅雨等用hplc法測定青黴素v鉀片的含量。儀器：jasco pu-980型高效液相色譜儀。色譜柱：diamonsil tm cl8柱(5μm，4.6mm×150mm)；流動相：水-乙腈-冰醋酸(325：175：3.5)；檢測波長：254nm；流速：1.0ml/min。
王雁等用hplc法測定青黴素v鉀片的含量。儀器：美國ssiseries iv 雙泵高效液相色譜儀。固定相：ods柱(4.6×250mm)；流動相：水-乙腈-冰醋酸(650：350：5.75)；流速：1.2ml/min；檢測波長：254nm。
另外，鄭建斌等用二次微分簡易示波伏安法測定青黴素v鉀的含量。