藥物分析之西藥分析——大分子右鏇糖酐檢查法

 a. 大分子右鏇糖酐檢查法
儀器裝置
如圖。a為內徑1.5~1.55cm、高58cm、底部為燒結玻璃的玻璃柱,上接內徑4.0~4.1cm、高22cm的加膠管b,b的上端連線恆壓貯液瓶c,以上各連線處均為玻璃磨砂接口,b的下端連一出水導管d,e為接受洗脫液試管。
操作方法
(1) 凝膠的浸泡
稱取葡聚糖凝膠(右鏇糖酐70用g-150,右鏇糖酐40用g-100)7~10g,加水200ml,在水浴中加熱5小時,時時輕輕攪拌,並趁熱反覆更換凝膠的上層液,以除去其中的雜質及過細的膠粒。
(2) 裝柱
於柱a內加滿水,接上加膠管b,然後於充分泡脹的凝膠中加入約為凝膠容量1/4體積的水,攪拌均勻後,沿管壁裝入加膠管中,加膠管與貯液瓶c相連,用水流洗,葡聚糖凝膠g-100流速為每小時20ml,g-150流速為每小時15ml,流洗量相當於2~3個凝膠床的總體積(約200~300ml),使柱床平衡、穩定、移去加膠管,吸去多餘的凝膠,使凝膠高度達50cm。
(3) 加樣
加樣前小心吸去凝膠面上的液體,並用出水導管使膠面液體流完,立即按各藥品項下的規定量,分兩次緩緩加入供試品溶液,開始收集並計量,待供試品溶液完全滲入膠面後,用水約2ml分兩次沖洗管壁,然後緩緩加水至膠面並與貯液瓶相連, 調節流速,葡聚糖凝膠g-100每小時約20ml,g-150每小時約15ml,在一定的壓力下進行洗脫。
(4) 洗脫
加樣後,待收集的洗脫液為凝膠總體積1/4左右時,開始分段收集,每管約3ml,照鏇光度測定法(附錄ⅵ e),分別測定右鏇糖酐含量,當合併洗脫液中右鏇糖酐的含量為加入量的10±0.5%時,為一個級分,共收集兩個級分,準確濃縮或稀釋至10ml,供測定含量和特性粘數用。
凝膠柱繼續洗脫,直至不含右鏇糖酐為止,以備下次使用。
(5) 大分子部分含量測定
取上述洗脫液,用長度0.5dm的測定管,照鏇光度測定法測定(附錄ⅵ e),測得的鏇光度乘以1.0256,即為每100ml中的含量(g)。
(6) 大分子部分特性粘數測定
取上述大分子部分含量測定項下溶液,照粘度測定法(附錄ⅵ g 第三法),自“用3號垂熔玻璃漏斗濾過”起,依法測定[η]<[1]>及[η]<[2]>,按下式計算10%大分子部分的特性粘數。
 [η]<[1]>+[η]<[2]>[η]<[1]>×a<[1]>-────────────(a<[1]>-10) 2[η]=─────────────────────────10
式中
[η]<[1]>為收集第一級分溶液的特性粘數;
[η]<[2]>為收集第二級分溶液的特性粘數;
a<[1]>為第一級分溶液含右鏇糖酐量相當於總加入量的百分數。