鹼催化水解主要用於酚苷、酯苷、烯醇苷及苷鍵β-位有吸電子基，如羰基、羧基。這些苷鍵有酯的性質，遇鹼可以發生水解，β-位有吸電子基使α-氫活化，鹼液中易與苷鍵起消除反應使苷鍵裂解。
脂肪族苷元和糖形成的苷對鹼穩定。
·酶催化水解
酶催化水解的特點是專屬性很強、條件溫和。
常用的酶： 麥芽糖酶 ───── 選擇性地水解α-葡萄糖苷鍵
苦杏仁苷酶 ──── 水解一般的β-葡萄糖苷鍵和有關的六碳醛糖苷
轉化糖酶 ───── 水解β-果糖苷鍵
纖維素酶 ───── 水解β-葡萄糖苷鍵
芥子苷酶 ───── 水解芥子苷
有些酶的水解反應與ph有關，如芥子苷酶水解芥子苷時，ph7或弱酸時，生成的產物為糖和異硫氰酸酯，而在ph3～4時酶解則生成腈和糖。
有些低聚糖苷由於組成糖鏈的糖的種類不同，可採用混合酶，常用的混合酶有粗橙皮酶、高澱粉酶、粗柑橘苷酶或以上這些酶的混合物。
·乙醯解反應
乙醯解是以ch3co+（ac+）為進攻基團，其開裂苷鍵的難易有與酸水解相似之處，如五碳糖苷鍵比六碳糖苷鍵易開裂。但也有與酸水解不同之處。苷鍵乙醯解難易與其鄰位是否有可乙醯化的羥基有關，如果在苷鍵的鄰位有羥基，可使乙醯解的速度降低。
乙醯解的試劑：乙酸酐與不同酸的混合液。
苷鍵乙醯解在雙糖中一般規律為: 1-6鍵＞1-4鍵＞1-3鍵＞1-2鍵。
乙醯解可用於多糖苷的結構研究中，糖與糖連線位置的確定。