牛黃解毒片處方為:人工牛黃5g,雄黃50g,石膏200g,大黃200g,黃芩150g,桔梗100g,冰片25g,甘草50g。
2005《中國藥典》牛黃解毒片含量測定項下:
色譜條件與系統適用性試驗:以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑;以甲醇-水-磷酸(45:55:0.2)為流動相;檢測波長為315nm。理論板數按黃芩苷峰計應不低於3000。
供試品溶液的製備:取本品20片(包衣片除去包衣),精密稱定,研細,取0.6g,精密稱定,置錐形瓶中,加70%乙醇30ml,超聲處理(功率 250w,頻率33khz)20分鐘,放冷,濾過,濾液置100ml量瓶中,用少量70%乙醇分次洗滌容器和殘渣,洗液濾入同一量瓶中,加70%乙醇至刻度,搖勻;精密量取2ml,置10ml量瓶中,加70%乙醇至刻度,搖勻,即得。
文獻報導的以黃芩苷為指標的,如:吳麗群用hplc法測定牛黃解毒片中黃芩苷的含量,採用agilent-1100高效液相色譜儀,色譜柱為diamonsic18,200×4.6mm id,5μm,流動相為甲醇-0.1%磷酸溶液(55:45),檢測波長274nm,柱溫室溫,流速1.0ml/min。樣品用70%乙醇超聲處理,結果回收率為101.6%,rsd小於1.3%。
李靜瑜用hplc法測定牛黃解毒片中黃芩苷的含量,採用惠普hp1100高效液相色譜儀,色譜柱為hp hypersil-ods(5μm,125×4mm),流動相為甲醇-水-磷酸(45:55:0.2),檢測波長315nm,柱溫室溫。
陳勝璜用雙波長法測定牛黃解毒片中黃芩甙的含量,採用日本島津uv-265紫外分光光度計,雙波長為240.2nm和278.0nm,樣品用75%甲醇超聲處理。
以蒽醌類為含量測定指標的文獻報導較多,如:李太平等用hplc法測定了大黃素、大黃酸的含量,採用島津lc-10avp液相色譜儀,色譜柱為diamonsil (tm 鑽石),c18柱(20cm×4.6,5μm),流動相為甲醇-水-磷酸(720:280:1),檢測波長254nm,流速1.5ml/min,柱溫 30℃。樣品用甲醇超聲處理後用鹽酸水解、氯仿提取,結果大黃素進樣量在0.469~1.407μg時呈良好的線性關係(r=0.9992),大黃酸在進樣量為0.3125~0.9375μg時呈良好的線性關係(r=0.9992),加樣回收率分別為98.2 %(大黃素), 98.4%(大黃酸),rsd分別為0.43%(大黃素),0.72%(大黃酸)。
楊冬梅等用薄層掃描法測定了大黃素的含量,採用島津cs-930薄層掃瞄器,以石油醚(30~60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15:5:1)的上層溶液,矽膠g板,λs=440nm,λr=560nm。樣品用乙醚超聲處理。
以膽酸為指標的,如:凌麗美用薄層掃描法測定了膽酸的含量,以異辛烷-正丁醚-冰醋酸(8:5:5)為展開劑,10%硫酸乙醇溶液為顯色劑,雙波長反射法鋸齒掃描λs=390nm,λr=650nm。樣品的處理方法:用甲醇超聲提取,再用20%氫氧化鈉回流提取,用稀鹽酸調節ph值至2,用醋酸乙酯提取。