（一） 重量法
根據樣品中分離出的單質或化合物的重量測定所含成分的含量。根據被測組分分離方法的不同，可分為提取法、揮發法、沉澱法。
1．提取法用適宜的溶劑提取出樣品中的某種成分，再蒸去溶劑進行測定。例如胰酶中脂肪含量測定是用乙醚提取後揮散乙醚，殘渣在105℃乾燥2hr稱重並計算。
2．揮發法是利用被測組分具有揮發性，或將它轉化為揮發性物質來進行含量測定的方法。“熾灼殘渣”為直接揮發法的一種特殊方式：“乾燥失重”為間接揮發法。
3．沉澱法是利用沉澱反應，將被測組分轉化成難溶物，以沉澱形式從溶液中分離出來，然後經過濾、洗滌、烘乾或熾灼，最後稱重並計算其含量的方法。
根據樣品中某些成分與標準溶液能定量地發生酸鹼中和、氧化還原或絡合反應等進行測定。如胰酶的澱粉酶測定是利用氧化還原反應，以澱粉為底物，經澱粉酶水解後產生還原糖，在鹼性溶液中還原糖又將斐林試劑中的cuz＋還原成cu＋，多餘的cu＋在酸性溶液中與ki作用析出碘，然後用硫代硫酸納滴定所析出的碘，來推算糖的含量，進而標定澱粉酶的效價。又如l鹽酸精氨酸是用電位滴定法測定含量的。
（三）比色法
樣品與顯色劑可發生顏色反應，依顏色反應的強度測定含量。如蛋白質的含量測定，可利用蛋白質與雙縮脲試劑發生顏色反應，而進行定量測定。硫酸軟骨素的含量也是用比色法測定的，具體介紹如下。
本品系自豬的喉骨、鼻中骨、氣管等軟骨組織提取製得的酸性粘多糖。按乾燥品計算，含氨基己糖以氨基葡萄糖計算，應不得少於24．0％。
本品採用elson-morgan色法測定含量，其基本原理為樣品先用鹽酸水解生成氨基己糖，然後在鹼性條件下與乙醯丙酮反應，生成色原物質，再與對二甲氨基苯甲醛反應產生紅色，以鹽酸氨基葡萄糖為對照品，用比色法測定。
對照品溶液的製備精密稱取經105℃乾燥至恆重的鹽酸氨基葡萄糖0.1g，置l00ml量瓶中，加水溶解並稀釋至刻度，搖勻；精密量取10ml，置l00ml量瓶中，加水至刻度，搖勻。每1ml中含鹽酸氨基葡萄糖0.1mg。
供試品溶液的製備取本品約0．15g，精密稱定，置50ml量瓶中，加6mol／l鹽酸液使溶解，並稀釋至刻度，搖勻；精密量取5rrll置5oml量瓶中，密塞，置水浴中水解2h，取出放冷，用氫氧化鈉溶液（1→5）中和至中性，加水至刻度，搖勻，用乾燥濾紙濾過，棄取初濾液，保留續濾液備用。
測定法精密量取對照品與供試品溶液各1ml，各取2份，分別置4支具塞試管中，各加水至5ml；另取具塞試管一支，加水5ml作為空白，各加乙醯丙酮試液 1ml，搖勻，置水浴中（1ml後密塞），準確加熱25min，取出，用冰水迅速冷卻後，加無醛乙醇3m1，在6o℃水浴中保溫10min後，再加對二甲氨基苯甲醛試液1ml，強力振搖，並繼續在60℃水浴中保溫1h，立即用冷水冷卻至室溫，照分光光度法，在525nm的波長處分別測定對照品溶液與供試品溶液的吸收度，以兩份的平均值，按下式計算：
（計算公式）
式中互為供試品溶液吸收度的平均值，s為對照品溶液吸收度的平均值，ws為對照品溶液每lml中含鹽酸氨基葡萄糖的量（mg），w為供試品重量（mg）， 0.8309為氨基葡萄糖與鹽酸氨基葡萄糖分子量的比值。本法專屬性強，操作簡便、結果穩定。值得注意的是實驗中所用乙醇必須是無醛乙醇。否則，將影響測定結果的準確性。
（四）紫外分光光度法
樣品或轉化後的產物在某一波長處有最大吸收，在一定的濃度範圍內，其濃度與吸收度成正比，則可進行定量測定。如蛋白質在280nm左右有最大吸收，胰蛋白酶與底物n－乙醯－l酪氨酸乙酯作用後的產物在237nm處有最大吸收，根據其吸收度可進行定量。
（五）高效液相色譜法
高效液相色譜法（hplc）法的種類很多，套用也十分廣泛，現將生化藥物中常用的方法概述如下。
1．反相高效液相色譜法（rp－hplc）以（c4、c8、c18）烷基矽烷鍵合相為柱填料，以甲醇-水、乙腈-水或甲醇、乙腈與緩衝液構成的溶液為流動相，以紫外、螢光或電化學檢測器為檢測手段，這種色譜體系在生化藥物（例如肽類、胺基酸、蛋白質、多糖等）定量分析中套用廣泛。例如：生白能（leucomax）的含量測定就是採用rp－hplc法。
本品系基因工程藥物。它的活性成分為重組人粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子（γhugm·csf），是一種調節造血和白細胞功能所必須的蛋白質。含量測定方法如下。
磷酸緩衝液的配製：稱取na2hpo43.55g，加水400ml，溶解後用稀磷酸調ph至7.0，加水至500ml，搖勻。
供試品及對照晶溶液的配製：精密稱取供試品或對照品適量，用上述磷酸鹽緩衝液配製成300μg／ml的溶液即可。