執業藥師《中藥化學》輔導:色譜法的套用

1、分配柱色譜:載體主要有矽膠、硅藻土及纖維素粉等。
分離水溶性或極性較大的成分如生物鹼、苷類、糖類、有機酸等化合物時,固定相多採用強極性溶劑,如水、緩衝溶液 等,流動相則用氯仿、乙酸乙酯、丁醇等弱極性有機溶劑,稱之為正相色譜:
分離脂溶性化合物,如高級脂肪酸、油脂、游離甾體等時,固定相可用石蠟油,流動相 用水或甲醇等強極性溶劑,稱為反相分配色譜。
2、吸附色譜法套用
(1)矽膠、氧化鋁吸附柱色譜過程中,吸附劑的用量一般為樣品量的30-60倍。樣品極性較小、難以分離者,吸附劑用量可適當提高至樣品量的100-200倍。
(2)矽膠、氧化鋁吸附柱色譜,應儘可能選用極性小的溶劑裝柱和溶解樣品,以利於樣品在吸附劑柱上形成狹窄的原始譜帶。
(3)洗脫所用溶劑的極性宜逐步增加。
(4)為避免發生化學吸附,酸性物質宜用矽膠,鹼性物質則宜用氧化鋁進行分離。
3、聚醯胺吸附色譜法
聚醯胺(polyamide)吸附屬於氫鍵吸附,特別適合分離酚類、醌類、黃酮類化合物。
(1)聚醯胺的性質及吸附原理
醯胺羰基與酚類、黃酮類化合物的酚羥基,或醯胺鍵上的游離氨基與醌類、脂肪羧酸上的羰基形成氫鍵締合而產生吸附。醫 學教育網原創吸附強弱則取決於各種化合物與之形成氫鍵締合的能力。
① 形成氫鍵的基團數目越多,吸附能力越強。
② 成鍵位置對吸附力也有影響。易形成分於內氫鍵者,其在聚醯胺上的吸附相對減弱。
③ 分子中芳香化程度高者,則吸附性增強;反之,則減弱。
一般情況下,各種溶劑在聚酸胺柱上的洗脫能力由弱至強,可大致排列成下列順序;水→甲醇→丙酮→氫氧化鈉水溶液→甲醯胺→二甲基甲醯胺→尿素水溶液
(2)聚醯胺色譜的套用
聚醯胺對一般酚類、黃酮類化合物的吸附是可逆的(鞣質例外),特別適用於該類化合物的製備分離,醫學教育 網原創可用於植物粗提物的脫鞣質。此外,對生物鹼、萜類、甾體、糖類、胺基酸等極性與非極性化合物也有著廣泛的用途。
4、大孔吸附樹脂
(1)大孔吸附樹脂的吸附原理:大孔吸附樹脂是吸附性和分子篩性原理相結合的分子材料。吸附性是由於范德華引力或產生氫鍵的結果,分子篩性是由於其本身多孔性結構所決定的。
(2)影響吸附的因素:大孔吸附樹脂本身的性質、溶劑的性質和化合物的性質是影響吸附的3個重要因素。
(3)大孔吸附樹脂的套用:苷與糖類的分離,生物鹼的精製,多糖、黃酮、三萜類化合物的分離。
(4)洗脫液的選擇:洗脫液可使用甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等。